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ELISA检测试剂盒常见问题问答

 发布时间:2018-01-12 点击量:312

以下是ELISA检测试剂盒常见问题问答整理分析出来以方便各位了解:

(1)问:小鼠乙酰胆碱Elisa检测试剂盒后期数据处理中空白的OD值有什么作用?

答:可以将标准品和样本的OD值同时减去空白的值进行计算,或者都不减,保持同一水平就行

(2)问:那我们算出来的ACH含量为什么出现负值?

答:说明个别样本的浓度很低,当浓度接近第6个点的时候,直线方程就有可能计算出负值。

(3)问:我两个空白孔一个啥都不加,一个加了后面的A液,B液还有终止液, 请问用哪一个

答:用加了A液,B液还有终止液的那个更加准确,因为样本都加过这些,可以排除相应的干扰。

(4)问:我想问一下,标准品浓度与标准品吸光度值之间是不是线性回归?检测出来的吸光度

值很低一般都存在哪些原因?大部分在0.08左右 ?(大鼠5羟色胺(5-HT)Elisa检测试剂盒

答:是线性回归。检测出来的值比较低 ,样本、稀释、操作等,原因很多,但只要在可操作范

围就行 。

(5)问:做出来的结果:标准品的吸光度呈线性回归,但是样品的吸光度都和本体吸光度值接

近,正常未予干预的大鼠血浆都基本没有5-HT 表达,这是什么原因?(大鼠5羟色胺(5-HT)

Elisa检测试剂盒)

答:样本、稀释、室控和机器操作等,原因都可能造成吸光度都和本体吸光度值接近,好像荧

光法里面有种试剂盒可以检测滴度。

(6)问:Elisa检测试剂盒的使用的方法是什么啊?

答:采用双抗夹心法 (目前暂行)

(7)问:一个孔需要多少量的血清?

答:一个孔上样量10-50微升。

(8)问:未处理的样本我需要邮寄多少的量?

答:每个孔需要100ul

(9)问:样本怎么保存?

答:当天要用的样本保存4℃,隔天样本-20℃(近期一个月左右要用的样本),长期保存样本

-70℃(一年或者更长时间多久都可以用),避免反复冻融。

(10)问:EP管是什么管?

答:离心管。

(11)问:收集血清的时候用什么管?

答:普通离心管即可。

(12)问:96t可以检测多少个样本?48t可以检测多少个样本?

答:96t标准的可以检测85个样本,其他有10个标准品孔,1个空白对照。96t单孔可以检测90

个样,7个标准品控 1个空白对照。48t标准的可以检测37个样本,其他有10个标准品孔,1个

空白对照。48t单孔可以检测40个样本,其他有7个标准品孔,1个空白对照。

(13)问:标准的检测85个样本的和单孔相比, 有什么好的地方吗?

答:标准的检测又叫复孔检测,标准的检验重复性测的结果好,所以大家都叫复孔是标准的检

测。

(14)问: 酶标板分次使用 剩下的建议怎么保持 ?

答:要是真的用不完或标本不多的情况下。做点处理后:板条和板架都是可拆卸的,可以再用

之,前拆下4条放置锡箔袋或其他无污染的袋子,放到冰箱 2-8度保存。

(15)问:酶标包被版是酶标板吗?

答:是的。

(16)问:请问植物茉莉酸和水杨酸检测的试剂盒,我们提取拟南芥的,一般取样量是多少?

答:1-3g。

(17)问:大鼠骨特异性碱性磷酸酶B(ALP-B)ELISA,大鼠血清抗酒石酸酸性磷酸酶5b

(TRACP-5B),我发现试剂盒里缺少标准品稀释液,没有它我的实验无法进行,盒子里面有特

殊稀释液是用来稀释样品的,但都没有标准品稀释液,我的样品已超出低检测限,所以需要

稀释标准品才行吗?

答:特殊稀释液是用来稀释标准品的,特殊稀释液一般情况不用当样本浓度特别高是先用特殊

稀释液稀释,标准品需要再稀释就也要用特殊稀释液。

(18)问:测出来的标准曲线值前面几盒都是0.98 才正常,后面怎么变成0.93了?

答:某个点偏离大可以去掉,保留5个点

(19)问:是不是空白对照就是什么都不加?

答:不加样本,不加样本稀释液,不加酶标试剂 其他都可以加。

(20)问:样本稀释液是配好的吗?

答:样本稀释液是配好的

(21)问:样本稀释液可以用来直接稀释血清吗?

答:可以,直接加40ul就可以。

(22)问:检测的时候需要在操净台中操作吗,还是在外面操作就可以了?

答:要求不是很严格,根据自己实验室的设备而定,都可以。

(23)问:人和肽素(copeptin)Elisa,洗涤液是浓缩的,是一次配好,还是现配现用?

答:浓缩的,现配现用。

(24)问:Elisa方法的不测人血小板第四因子里IgG抗体的滴度吗?

答:Elisa不测滴度的,荧光法可以测。

(25)问:酶标板不平,影响结果吗?

答:不影响结果的。

(26)问:小鼠TNF-α ELISA 我的标本是细胞,我想要测的结果:抑制TNF的产生 空白组、

模型组、药物组,药物组要成梯度抑制TNF的产生、请问Elisa方法的可以测吗?

答:细胞可以测 但要分组,得到相应的梯度值,计算结果。自己需要多查阅文献 。

(27)问:人睾酮(T)Elisa,人雌三醇(E3)Elisa,是用什么酶标记的?

答:辣根酶标记的 标本里不能加叠氮化钠

(28)问:我测植物水杨酸,标本是烟草叶片怎么处理的?那上清液检测SA时,还需要用甲醇

抽提吗?

答:称取烟叶500mg,研磨成粉末状,加入5ml浓度为0.01mol,PH值为7.4的PBS溶液,充分匀

浆,离心取上清液(3000-4000转,15分钟左右),分装保存,一般需要长期保存需放在-80度

,或者液氮中,备用,不用加甲醇。

(29)问:没有做出标准曲线来,你知道什么原因吗?

答:操作肯定有问题,做之前把标准品摇匀下。

(30)问:买同一个指标的几个盒子,用不用都做标准曲线?

答:如果同一个指标买了3盒,建议每盒都做个标曲。同一个盒子 ,即使分几次用,做一个标

曲也行了,因为数值不会偏差太大,差不多。