欢迎进入上海语燕生物技术有限公司!
新闻中心
首页 > 新闻中心 > 大鼠天门冬酶免试剂盒试剂盒使用说明

大鼠天门冬酶免试剂盒试剂盒使用说明

 发布时间:2015-07-22 点击量:255

   本公司专业供应酶免试剂盒,品质保证,价格优惠,可免费提供代测服务,咨询!本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断。大鼠天门冬氨酸氨基转移酶(AST)定量检测试剂盒(酶免)使用说明书本文由ELISA试剂盒厂家上海哈灵生物科技有限公司提供

  【大鼠天门冬氨酸氨基转移酶(AST)酶免试剂盒试剂盒名称】

  大鼠天门冬氨酸氨基转移酶(AST)定量检测试剂盒(酶免)

  【大鼠天门冬氨酸氨基转移酶(AST)酶免试剂盒试剂盒用途】

  定量检测大鼠血清、血浆及相关液体样本中天门冬氨酸氨基转移酶(AST)的含量。

  【大鼠天门冬氨酸氨基转移酶(AST)酶免试剂盒检测原理】

  本试剂盒采用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法(酶免)。将标准品、待测样本加入到预先包被大鼠天门冬氨酸氨基转移酶(AST)单克隆抗体透明酶标包被板中,温育足够时间后,洗涤除去未结合的成分,再加入酶标工作液,温育足够时间后,洗涤除去未结合的成分。依次加入底物A、B,底物(TMB)在辣根过氧化物酶(HRP)催化下转化为蓝色产物,在酸的作用下变成黄色,颜色的深浅与样品中大鼠天门冬氨酸氨基转移酶(AST)浓度呈正相关,450nm波长下测定OD值,根据标准品和样品的OD值,计算样本中大鼠天门冬氨酸氨基转移酶(AST)含量。备注:标准品(1号→6号)浓度依次为:200、100、50、25、12.5、6.25U/L.本文由ELISA试剂盒厂家哈灵生物提供!

  加标准品和待测样本:取足够数量的酶标包被板,固定于框架上,分别设置标准品孔、待测样本孔和空白对照孔,记录各孔位置,在标准品孔中加入标准品50μL;待测样本孔中先加入待测样本10μL,再加样本稀释液40μL(即样本稀释5倍);空白对照孔不加。4、温育:37℃水浴锅或恒温箱温育30min。5、洗板:弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板4次(也可用洗板机按说明书操作洗板)。6、加酶标工作液:每孔加入酶标工作液50μL,空白对照孔不加。7、温育:37℃水浴锅或恒温箱温育30min。8、洗板:弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板4次(也可用洗板机按说明书操作洗板)。9、显色:每孔先加入显色剂A液50μL,再加入显色剂B液50μL,平板混匀器混匀30s(或用手轻轻震荡混匀30s),37℃避光显色15min。10、终止:取出酶标板,每孔加终止液50μL,终止反应(颜色由蓝色立转黄色)。

  测定:以空白孔调零,在终止后15分钟内,用450nm波长测量各孔的吸光值(OD值)。12、计算:根据标准品的浓度及对应的OD值,计算出标准曲线的直线回归方程,再根据样本的OD值,在回归方程上计算出对应的样品浓度,也可以使用各种应用软件来计算。终浓度为实际测定浓度乘以稀释倍数。【大鼠天门冬氨酸氨基转移酶(AST)酶免试剂盒样本要求】1、样本不能含叠氮钠(NaN3),因为叠氮钠(NaN3)是辣根过氧化物酶(HRP)的抑制剂。2、标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能立即试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。3、样本应充分离心,不得有溶血及颗粒。【大鼠天门冬氨酸氨基转移酶(AST)酶免试剂盒注意事项】1、实验严格按照说明书的操作进行,实验结果判定必须以酶标仪读数为准。2、酶标包被板开封后如未用完,应立即装入密封袋中加干燥剂保存。3、建议所有的标准品、样本和空白对照都做双份检测,取平均值,以减小实验误差。

  

  4、牢记样本已经稀释5倍,计算结果乘以5才是样本实际浓度。

  5、本试剂盒定量范围为6.25-200U/L,超过此范围,为标准曲线延伸计算所得,不做为准确定量结果,请用特殊稀释液稀释后测定准确结果(6.25-200U/L范围内),乘以总稀释倍数即为样本终浓度。

  6、若显色过浅,可适当延长底物温育时间。

  7、为避免交叉污染,标准品、样本和空白对照每加一个就要更换一次吸头;酶标工作液、样本稀释液和底物等公共组分,要悬臂加样,不得碰到微孔;不得重复使用封板膜。

  8、试剂盒保质期内使用,不同批号的试剂不得混用。

  9、底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。【大鼠天门冬氨酸氨基转移酶(AST)酶免试剂盒操作程序总结】

  准备试剂,样品和标准品

  加入准备好的样品和标准品,37℃反应30分钟

  洗板4次,加入酶标试剂,37℃反应30分钟

  洗板4次,加入显色液A、B,37℃显色15分钟

  加入终止液

  15分钟之内读OD值计算【大鼠天门冬氨酸氨基转移酶(AST)酶免试剂盒检测范围】

  6.25U/L-200U/L

  【大鼠天门冬氨酸氨基转移酶(AST)酶免试剂盒规格】

  96T/盒

  【大鼠天门冬氨酸氨基转移酶(AST)酶免试剂盒贮藏】

  2-8℃,避光防潮保存。

  【大鼠天门冬氨酸氨基转移酶(AST)酶免试剂盒有效期】

  6个月